納米PCR試劑盒于動(dòng)物（唾液、胰臟等）、植物（麥芽、山萮菜）及微生物。微生物的酶幾乎都是分泌性的。此酶以Ca2+為必需因子并作為穩(wěn)定因子和激活因子，也有部分淀粉酶為非Ca2+依賴型。淀粉酶既作用于直鏈淀粉，亦作用于支鏈淀粉，無(wú)差別地隨機(jī)切斷糖鏈內(nèi)部的α－1，4-鏈。因此，其特征是引起底物溶液粘度的急劇下降和碘反應(yīng)的消失，zui終產(chǎn)物在分解直鏈淀粉時(shí)以葡萄糖為主，此外，還有少量麥芽三糖及麥芽糖，其中真菌a-淀粉酶水解淀粉的終產(chǎn)物主要以麥芽糖為主且不含大分子極限糊精，在烘焙業(yè)和麥芽糖制造業(yè)具有廣泛的應(yīng)用。另一方面在分解支鏈淀粉時(shí)，除麥芽糖、葡萄糖、麥芽三糖外，還生成分支部分具有α-1，6-鍵的α-極限糊精（又稱α-糊精）。一般分解限度以葡萄糖為準(zhǔn)是35-50%，但在細(xì)菌的淀粉酶中，亦有呈現(xiàn)高達(dá)70%分解限度的（zui終游離出葡萄糖）；

 

　　納米PCR試劑盒是一類含有鐵啉基團(tuán)的電子傳遞蛋白，只存在于需氧細(xì)胞中。細(xì)胞色素在線粒體內(nèi)膜上起傳遞電子的作用。細(xì)胞色C （cytochrome c） 是細(xì)胞色素一種。它在線粒體呼吸鏈上位于細(xì)胞色素B 和細(xì)胞色素氧化酶之間，是呼吸鏈的一個(gè)重要組成部分。每分子細(xì)胞色素C含有一個(gè)血紅素和一條多肽鏈?，F(xiàn)已從許多來(lái)源獲得細(xì)胞色素C結(jié)晶，并已對(duì)100多種細(xì)胞色素C蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，細(xì)胞色素C的氨基酸殘基的數(shù)目在103~113之間；不同來(lái)源細(xì)胞色素C的的氨基酸殘基的順序及含量都有一定的差異。

 

　　納米PCR試劑盒中賴氨酸含量較高，等電點(diǎn)為10.7，含鐵量為0.38%~0.43%，Mr為12000~13000，豬心細(xì)胞色素C分子量12200。細(xì)胞色素C是一種穩(wěn)定的可溶性蛋白，它易溶于水及酸性溶液，故常用酸性水提取。細(xì)胞色素C分為氧化型和還原型兩種，氧化型水溶液呈深紅色，還原型水溶液呈桃紅色。細(xì)胞色素C對(duì)熱比較穩(wěn)定，不易變性。pH 7.2~10.2, 100℃加熱3分鐘，納米PCR試劑盒氧化型和還原型變性程度均為18%~28%，若增加加熱時(shí)間，氧化型的不可逆變性程度比還原型的為高。細(xì)胞色素C對(duì)酸堿也較穩(wěn)定，可抵抗0 .3mol/L氫氧化鉀溶液的長(zhǎng)時(shí)間處理。一般都將細(xì)胞色素C制成還原型的，因?yàn)楸容^穩(wěn)定并易于保存。

 

　　納米PCR試劑盒主要用于科研方面，不用于臨床診斷，可以用于檢測(cè)各種指標(biāo)。

 

　　納米PCR試劑盒操作步驟：

 

　　1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）；

 

　　2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，納米PCR試劑盒盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻；

 

　　3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘；

 

　　4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用；

 

　　5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干；

 

　　6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外；

 

　　7. 溫育：操作同3；

 

　　8. 洗滌：操作同5；

 

　　9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘；

 

　　10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）；

 

　　11. 測(cè)定：納米PCR試劑盒以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。